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猪圆环病毒病诊断和综合防控技术
猪圆环病毒病诊断与综合防控技术
陈秋勇 王隆柏 车勇良 陈如敬 吴学敏 王晨燕 刘玉涛 周伦江*
（福建省农业科学院畜牧兽医研究所 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心 福州 350013）
摘 要 猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型（PCV-2）引起的,以系统功能障碍、免疫力下降为特征的一种传染病,猪是唯一的易感宿主,各年龄段的猪均可感染.我国自2001年发现该病以来,全国各地不同规模化的猪场都在发生该病,给生猪养殖行业造成了巨大的经济损失.文中从猪圆环病毒病的病原、流行特点、临床症状、诊断和防控措施进行阐述,为猪圆环病毒病的综合防治提供一定的参考依据.
关键词 猪圆环病毒 诊断 防控
文献标识码：A
文章编号：1003-4331（2017）05-0023-04
Diagnosis and comprehensive control technology of porcine circovirus disease
Chen Qiuyong Wang Longbai Che Yongliang Chen Rujing
Wu Xuemin Wang Chenyan Liu Yutao Zhou Lunjiang*
（Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Fujian Academy of Agricultural Sciences,
Fujian Animal Disease Control Technology Development Center, Fuzhou 350013）
Abstract The diseases of porcine circovirus is an infectious diseases caused by porcine circovirus serotype 2 which characterize by system dyunction and immunity decrease by degrees. Pig is the only susceptible host, and all ages can be infected. Since the PCV was discovered in 2001, the disease has occurred in different scale pig farms across the country, which has brought great economic loss in the pig breeding industry. The article described characteristics of virus, epidemiology, clinical symptoms, diagnosis and control mesasures, intends to provide reference for comprehensive prevention and control of PCV.
Key words Porcine circovirus Diagnosis Control
猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型（Porcine circovirus serotype 2,PCV2）引起的传染病.PCV-2能够引发猪的呼吸道综合征（PRDC）、猪皮炎肾病综合征（PDNS）、增生性坏死性肺炎（PNP）、新生仔猪先天性颤抖病（CT）和母猪流产及死亡综合征等[1],给生猪养殖行业带来了巨大的危害.
我国自2001年首次报道猪感染猪圆环病毒以来,该病一直在全国各地不同规模的猪场流行[2].其主要表现为断乳后2~3周的仔猪渐进性消瘦、病态、全身衰竭、背脊突出、被毛长且粗乱、皮肤苍白或黄疸、体表淋巴结肿大,并伴有呼吸道和腹泻症状,生长发育迟缓或停滞,饲料利用率降低,严重者可导致死亡,康复猪成为僵猪而淘汰.
1 病原学
猪圆环病毒2型（PCV-2）属于圆环病毒科（Circoviridae）、圆环病毒属（Circovirus）的成员,圆环病毒科还包括鸡贫血病毒（CI）、鹦鹉啄羽病毒（PBFDV）和鸽圆环病毒（PICV）三种病毒.猪圆环病毒2型（PCV-2）基因组为单链环状DNA分子,大小1 759-2 319 nts.病毒粒子呈球型,小而无囊膜,直径约17 nm,20面体对称结构,是已发现最小的动物病毒[3].
PCV-2基因组全长约为1 766 bp,通常含有11个ORF,其中ORF1、ORF5、ORF7和ORF10在病毒链上,而ORF2、ORF3、ORF4、ORF6、ORF8、ORF9和ORF11在互补链上,这些基因表明为重叠基因,从而充分利用了病毒有限的遗传物质[4].研究较为深入的为ORF1和ORF2,二者的长度都大于600 bp,ORF1编码与病毒复制相关的Rep蛋白,而ORF2编码病毒的主要结构蛋白-Cap蛋白,也是主要的免疫蛋白.
对于PCV-2基因分型,很多学者都提出了不同的原则和方法.欧盟猪圆环病毒委员会提出将PCV-2分为PCV-2a 、PCV-2b、 PCV-2c三种基因亚型的分类法被广泛接受[5].我国目前PCV-2分离株主要以PCV-2b亚型为主,是近年来国内流行毒株的优势基因型.
2 流行特点
PCV-2对猪有较强的感染性,可经口腔及鼻腔分泌物、呼吸道、粪便、尿液等途径感染不同年龄的猪群,尤其是粪便在PCV-2传播中起重要作用,以哺乳仔猪和育成期的猪最易感,5~12周龄的仔猪,一般于断乳后2~3 d开始发病,急性发病猪群中,病死率可达10%.同时,研究发现PCV-2在成年猪群中血清阳性率高达90%[6],说明PCV-2感染率较高,但是其在不同年龄的猪群感染,危害程度不一.育肥猪多表现为隐性感染,不表现临床症状；怀孕母猪感染PCV-2,能在胎儿体内繁殖并引起不同怀孕母猪流产或者产死胎、木乃伊或弱仔及繁殖障碍,少数怀孕母猪感染PCV-2后,可经过胎盘垂直感染胎儿,造成仔猪先天性震颤；可以在成年公猪检测到PCV-2并固定存在,人工授精或自然交配是PCV-2在种猪群中散布的潜在途径.
研究发现猪单独感染PCV-2,只有轻微或者中等的病症出现.往往在感染PCV-2的患猪中可以检测出其他疾病的伴发,而且潜伏期都比较长,有的在母猪怀孕时就感染,有的出生早期感染,有的隐形带毒,而临诊症状表现不明显.猪圆环病毒除与其他病原混合感染外,还与免疫刺激、环境因素和应激因素息息相关.
3 临床症状及病理变化
不同的猪群感染PCV-2时,其表现和临床症状往往不一样.可以引起以下多种症状.
3.1 仔猪断乳后多系统衰弱综合征（PMWS） 顾名思义就是仔猪（6~8周龄）多个系统出现了病变,主要病变是淋巴系统,特别是腹股沟淋巴结,比平时大2~
5倍,实验室检测可发现B淋巴细胞和T淋巴细胞都相对应大幅度减少.患有PMWS的仔猪皮肤苍白、精神萎靡、食欲下降、体温升高、不愿意运动、下痢、黄疸、呼吸困难,有时犬坐呼吸、生长持续发育不良,渐进性消瘦,与同年龄的猪相比较生长发育和体重相差较大,有的还会出现皮炎、水肿.剖检可见肝、脾、肾、淋巴结都有不同程度肿大和坏死,支气管和肺脏有炎症出现[7].
3.2 猪皮炎肾病综合征（PDNS） 一般在8~18周龄的猪容易出现这种现象.PNDS是典型的过敏反应,其特征性临床症状是患猪从阴部和后肢部位逐渐往前肢、头部、耳部发展,出现红色或者紫色不规则斑块,中心有可能呈黑色,大小不一.患有PDNS的猪体温会上升,皮下发生水肿[8],食欲大幅度下降甚至废绝,淋巴结肿大.感染较轻者体温升高不明显,之后可以自愈,不影响猪的发育.剖检主要病理变化为动脉炎、出血性坏死性皮炎、间质性肾炎和渗出性肾小球肾炎,可见肾脏肿大、苍白,表面覆盖出血小点；脾脏轻度肿大,出血；肝脏呈桔.
3.3 仔猪先天性震颤（CT） 主要发生于刚出生的仔猪,呈双相性,当睡觉或者躺下时肌肉不震颤,站立时四肢及全身肌肉都在发抖,尤其是头部震颤最严重,导致仔猪不能正常吃乳,死亡率极高.除震颤外无其他明显病变,患病轻微者,经过2~3周可自愈[9].
3.4 母猪繁殖障碍 感染PCV-1和PCV-2均可造成母猪繁殖障碍,但是感染PCV-2造成的繁殖障碍比感染PCV-1严重得多,感染该病的母猪,无明显肉眼可见的病变,往往会导致母猪返情率增加,产死胎、木乃伊胎、流产和产弱仔,长大后形成僵猪.死亡的胎儿经实验室检测,可以检测出PCV-2病毒,进行确诊.
3.5 猪呼吸道综合征（PRDC） 由于PCV-2会严重抑制猪的免疫系统,会伴发很多疾病的发生,猪呼吸道综合征便是其中的一种.PCV-2主要以呼吸道的方式传播,集约化的猪场饲养密度又够大,通风不良,往往会导致患猪出现呼吸困难、咳喘,体温升高,厌食,发育不良.剖检可发现细支气管、支气管发炎,甚至出血,有纤维性渗出物.
3.6 坏死性间质性肺炎（PNP） 主要感染7~17周龄的猪,一般有其他病原体的参与,发病率为2%~30%,病死率为4%~10%.主要病理变化是出现弥漫性的间质肺炎,颜色呈灰红色.
4 诊 断
该病单纯根据流行病学和临床症状观察难以确诊,必须依靠实验室诊断.可采用病毒分离、间接免疫荧光试验、免疫组化技术、核酸探针、酶联免疫吸附试验和PCR等实验室诊断方法.而因该病在临床上常常与其他病原混合感染,同时病毒分离、免疫荧光试验等方法对操作者、实验室的要求较高,因此,常规的PCR或者多重的PCR是常用的实验室诊断方法.在临床诊断时,要注意与猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、副猪嗜血杆菌病、大肠杆菌病、水肿病等其他疾病的区分[10].
5 防控技术
目前已有多家猪圆环病毒2型疫苗投放市场,用于PCV-2的免疫预防,主要包括灭活疫苗、重组疫苗、DNA疫苗及嵌合病毒疫苗等.当前我国主要的商品化疫苗是亚单位疫苗和灭活疫苗,德国勃林格殷格翰公司利用昆虫杆状病毒表达Cap蛋白,成功研究了PCV-2亚单位疫苗,该疫苗的有效性得到广大猪场的肯定；梅里亚公司的灭活疫苗,主要用于种猪群的免疫接种工作.而我国青岛易邦也于 2014年成功研制出国际领先、国内第一个猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗,国内第一个兽用病毒样颗粒（VLPs）疫苗.同时,国内还有3种自主研发的灭活疫苗上市,分别是LG株、SH株和DBN-SX07株,分别是由哈尔滨兽医研究所、南京农业大学和大北农集团研制的灭活疫苗,也在国内各大养殖场使用.
针对PCV-2病毒感染,上述疫苗可用于预防、减少或者改善患猪的临床症状,但是仅仅依赖疫苗要控制该病,似乎也是不能肯定的事情,因此,必须通过综合防控措施进行有效的控制和预防该病.
5.1 疫苗免疫 目前常使用的疫苗有亚单位疫苗和灭活疫苗两种,主要有两种免疫手段,一种是对母猪进行免疫,一种是对仔猪进行免疫.梅里亚公司生产的圆环病毒病灭活苗常常采用免疫母猪手段.对母猪进行免疫省时省力,仔猪能够获得足够多的早期母源抗体,如果怀孕母猪因感染PCV-2而导致流产、产死胎、木乃伊胎,则更需要对母猪进行紧急被动免疫,怀孕母猪和后备母猪在配种前2周要进行一次免疫接种.而其余类型的圆环病毒病疫苗常常采用免疫仔猪的手段,正常推荐14日龄免疫,亚单位疫苗由于抗原含量和生产工艺等方面的优势,往往只需要免疫1次即可.而灭活疫苗则需要根据猪场猪群的生产情况和疫病压力有选择性地确定免疫日龄和免疫次数.
猪圆环病毒病疫苗的免疫与否,与猪群圆环病毒病的发病率和存活率息息相关,同时还应注意做好猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病等的疫苗免疫工作.
5.2 严格生物安全措施 保持猪场内环境卫生,对进出人员和车辆进行登记、消毒处理,无关人员一律谢绝参观.加强引种前抗体检测和隔离工作,平时注重场地消毒,执行消毒计划.呼吸道传播是感染PCV-2的重要传播途径之一,注意喷洒消毒水时不能直接对着猪身上喷,避免引起发炎,消毒剂最好选择醛类消毒剂.同时,加强灭鼠、灭蝇等卫生工作.
5.3 加强饲养管理,科学饲养 实行自繁自养制度,按照全进全出的原则进行生产,尽可能减少不同日龄猪的混群饲养,避免病原的交叉感染.制定并执行生猪生产标准化操作流程,包括猪的进食、休息、排泄地点固定等工作.现在的猪场大部分是自动投喂料系统,过一阶段要对管道进行检测、清理,防止饲料堆积在管道内发霉,易引起猪圆环病毒病；做好猪场的降温或保暖工作,夏天要通风降温,减少氨、硫化氢等有毒气体的浓度,但是要避免鸟类等飞行动物进入猪场,冬天要保暖,尤其是刚出生的仔猪,适宜的温度尤为重要,控制好温度差,随生长呈阶梯型降温；养殖密度要适当,最合适的养殖密度为1~1.5 m2/头,减少因过度拥挤而造成的疾病穿插传播；不同品种、不同日龄的猪要分栏饲养,转栏时尽量减少猪的应激反应,惊恐等应激反应也是引起猪圆环病毒病的重要原因；猪圆环病毒主要是抑制猪的免疫系统,导致营养不良、消瘦等症状,因此,饲料配方要随仔猪的生长进行调整,及时适量补充维生素、矿物质、微量元素,提高猪的抵抗力,减少感染PCV-2的风险.总之,技术人员和饲养员要密切关注猪的日常变化,一旦有情况要及时处理.
5.4 合理用药,控制继发感染 树立“防重于治,养重于防,养防结合,饲管优先”的科学防控理念.由于猪圆环病毒病没有特效的治疗药物,所以,一旦感染,不能盲目使用各种药物,也不能大剂量使用,首先能做到的就是控制继发细菌性感染,针对所检测出的病原科学选择一些抗生素,减少细菌的感染.科学合理地使用药物能够明显控制其他病原的继发感染,同时大大降低死亡率.
6 小 结
自PCV-2发现以来,由PCV-2引起的猪圆环病毒病危害日益严重,给我国生猪养殖业造成了巨大的经济损失,已引起有关兽医部门和兽医科技工作者的重视.近年来,随着猪圆环病毒致病机理的深入研究、多种类型圆环病毒病疫苗的开发和使用,该病已得到进一步控制.但是,当前仍然没有哪一种疫苗可以完全预防和控制猪圆环病毒病,在实际生产中需要做好疫苗免疫、生物安全和饲养管理等综合防控措施,才能有效预防和控制猪圆环病毒病.
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