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食用油脂中转基因成分的分子检测技术进展

摘 要：日常生活中食用植物油脂不可或缺,而我国进口制油原料中相当数量为转基因原料.目前食用油脂主要的研究技术为理化及分子生物学技术.本文概述了食用油脂中转基因成分的分子检测技术的进展情况.

自20世纪80年代世界第一例转基因作物诞生以来,转基因作物在提高产量、改良品质、抗逆能力等方面越来越显示出巨大作用.在我国进口的制油原料中,有相当数量均为转基因产品.然而由于转基因作物可能存在的安全性问题,使得转基因产品的标签成为公众关注的热点.为了保证消费者的知情权和选择权,已有30 多个国家制定了相应的法律法规,对转基因作物及其衍生产品的标签进行管理.我国新出台的《食品安全法》中亦明确规定：生产经营转基因食品应当按照规定显著标示.因此,建立合适的检测手段以确定食品中是否含有转基因成分已成为当务之急.

自DNA分子技术兴起后,国内外发展了多种转基因食品DNA检测方法.目前对于外源基因的检测主要是通过对转入的外源基因进行PCR扩增,然后进行紫外或荧光检测.PCR技术全称DNA聚合酶链式反应技术,是一种在体外由引物介导的DNA聚合酶催化的聚合反应,能在短时间内准确地把目的序列大量复制,在转基因食品检测方面,主要是用于从DNA即基因水平来鉴定被测食品.但其在日常检测中仍存在以下问题：各种提取方法通用性不好,在物种和食品种类中存在扩增成功率不同的问题；检验灵敏度和效率都不高.

从食用油脂中提取出可用于核酸检验的DNA是进行转基因成分检验的关键步骤.然而,由于制取食用油的原料、原料处理、加工工艺和食用油储存条件以及储存时间地长短都会导致食用油中DNA残留量不同.因此,有必要针对不同的食用油设计出最优DNA提取方案,以便进一步摸索出外源基因的最佳PCR检测方法.

食用油脂中转基因成分检测的最大障碍是DNA的提取,因为经过一系列深加工,油脂中DNA含量较低,且受破坏较严重,提取难度大.如Gryson研究组发现,大豆油经过前两道工序离心除杂、脱胶后,几乎可以除去其中的DNA,PCR的扩增结果为阴性.为了攻克这一难题,国内外研究组对常用的DNA抽提技术进行改良,以期获得稳定可行的DNA提取技术,现阶段有些研究组已取得一些成效.如白立群等建立的冷冻干燥法成功检测出大豆油中的内源基因和外源基因；Costa等对样品进行冷冻离心预处理再结合CTAB的方法,也可提取获得大豆油中的DNA；Gryson等对样品量进行梯度研究,提示在增大样品量后,可以得到扩增所需的DNA模板.此外,商业化的食品DNA抽提试剂盒也引起了关注.通过对试剂盒提取食用油DNA的比较研究,得出比较好的食用油DNA提取试剂盒有QIAamp DNA stool extractionkit (Qiagen)、The Nucleospin? food kit和WizardMagnetic DNA Purification System for Food.然而,由于各研究组的局限性,很多DNA抽提方法只针对单一品种,没有同时对几种食用油进行针对性和系统性的研究.（基金项目：湖北省食品药品监督管理局科研项目,食用油脂中转基因成分的分子检测技术的研究（课题编号：201601014））

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