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关于乳和乳制品中细菌总数的检测技术
摘 要：本文分析了如何对乳与乳制品中的细菌进行检测,并分析检测技术的原理、方法以及优缺点.
关键词：乳；乳制品；细菌总数；检测技术
中图分类号：TS252.1
乳与乳制品含有丰富的营养物质,能为人体的成长发育提供相应的营养物质,但是其在生产、制备、加工、运输等过程中可能会被细菌等微生物污染,从而导致其带有一定的危害性,对人体造成伤害,所以对乳与乳制品中的细菌进行检测是很有必要的.
1 培养法
1.1 标准平板计数法
一般来说,细菌总数检测最广泛的方法是标准平板计数法或需氧菌计数法,该方法不仅操作简单,而且检测效果准确.在操作的过程中,首先需要制备相应的培养基,并在培养皿中加入相应的乳与乳制品的样品,并加入适量的培养液,等待样品与培养液凝固之后再涂抹一定量的样品,保证样品量充足.整个操作过程需要在固定的温度下进行,并且对其进行45 h左右的培养,然后即可进行菌落的计数操作.Robert 在19 世纪末期提出了琼脂平板培养法,主要是用来检测微生物的数量,直到现在仍然作为细菌数量检测的标准方法,而且有很多快速的检测技术也是基于这一技术进行创新的.标准平板计数法是我国检测细菌总数的国家标准,该法的缺点是操作时间较长,需要消耗大量的人力、材料,而且检测结果中的细菌并不能保证所有细菌都是活性细菌,其检测结果的准确性还有待提高[1].
1.2 培养法的改进
为了保证细菌总数检测的准确性,并提高其检测的效率,需要对原有的培养方法进行改进,其改进的方法和内容包括：①疏水网格滤膜法.疏水网格滤膜法是滤膜法中最常见的方法之一,该方法在应用的时候需要使用到滤膜,一张滤膜会有1 600 个网格,而疏水格是对菌落进行约束,避免菌落发生扩散.在实际操作的过程中需要将疏水物质刻印到滤膜上,然后将滤膜上的细菌放置到培养基上培养,最后即可进行人工技术或者自动菌落技术操作.②皿膜系统与即用胶系统.皿膜系统即干片法或纸片法,其主要是通过应用一些高分子材料制备而成的培养基载体对试纸或胶片进行检测,其效果比较明显,而且操作简单.3M 微生物公司生产的细菌总数测试片（PAC）为双层膜系统,内含干燥营养物质与冷水可溶胶制剂.在实际操作的过程中,相关工作人员需要选取1 mL 的样品液体,将其滴于基础膜中间,盖上含有胶凝剂和TTC 的覆盖膜,与SPC 法一样培养后,直接在膜系统上对菌落进行计数,其检测准确性较高.该方法的缺点有：操作比较复杂、操作难度高、对操作人员的专业素质要求较高[2].
2 镜检法
2.1 直接显微镜计数法
直接显微镜计数法（DMC）是一种常规的显微镜检测计数方法,其主要工作原理是将样品涂抹到物镜玻片上,并将样品进行干燥、染色,然后在显微镜下进行观察,并通过人工操作,从而观察出样品中含有的细菌总数,再推算出总乳制品中含有的细菌数量.这种方法有着诸多优点：检测速度快、操作简单、应用的检测设备少、能在短时间内得出检测结果.但,是DMC 检测方法的检测精确度较低,而且应用范围不是很广泛；另外,该方法不能有效地对活菌和死菌进行区别,所以说该方法还有待完善.
2.2 直接表面荧光过滤器技术
直接表面荧光过滤器技术（DEFT）是将滤膜法和荧光显微技术有机结合来进行细菌总数检测的方法,该方法的检测效率较高,应用范围也比较广泛.在实际检测的过程中需要对乳样品进行酶处理或者活性剂的处理,这样可以有效提高样品中细菌的活性.该方法的检测周期为30 min 左右,也可以加入相应的活性剂或者酶来缩短整个检测周期.相比SPC 法,DEFT 的相关系数为0.81 ～ 0.91,但是DEFT 的检测重复性要比SPC低很多,这也是DEFT 检测法的特点之一,其主要原因是不同生长阶段细菌的染色体有不同的性质,其与染色剂的结合程度以及结合后显色程度都不同,这就有效降低了检测的重复性[3].DEFT 法的主要缺点是检测过程中需要设备比较多,而且设备成本都比较昂贵,所以说该方法的整体检测成本高,应用不是很广泛.
3 流式细胞计数
流式细胞计数（FCM）是一种无需培养就可以直接检测样品中细菌的方法.为了保证检测结果的准确性,在检测的过程中需要将带菌的样品流过一个小孔,由于带菌乳样品与周围介质的点传导率存在差异,所以经流小孔时在激光的照射下能检测出乳样品中的细胞大小、性质以及密度等,最后用相应的荧光物质对细胞进行标记,从而对细菌总数进行计数操作.因为乳样品中含有蛋白质以及脂肪颗粒,这在一定的程度上会影响检测效果,所以需要加入一些酶来清除这些物质,从而有效保证检测效率.一般来说,FCM 检测法的检测时长为15 min,如果连续检测,其检测时长会有所缩短.
4 结语
对乳及乳制品中细菌总数检测的方法有多种,不同的检测方法有各自的特点和优势.在实际检测的过程中,需要根据实际情况选择相应的检测方法,从而保证检测的准确性.本文提出了多种细菌总数检测的方法,包括标准平板计数法、直接显微镜计数法以及流式细胞技术法等等,通过比较,应用最多的还是SPC 法.通过分析研究,发现细菌总数快速检测方法检测准确性的关键是HACCP 系统能否施行,其影响的因素包括：检测过程中需要损耗的劳动力、财力以及检测样品的投入资金,检测设备的自动化程度、设备检测时间及设备检测的精度.对上述因素进行严格控制,才能保证乳品中细菌总数检测的准确性.
技术研究论文范文结:
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3、农村新技术杂志
4、现造技术论文